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1. 登陆生工生物官方网站,点击“技术服务”标签栏中的“在线订购DNA合成订单”或者在“在线订购”标签栏中的 "DNA 合成"。

 

2. 在订单页面”,您可以选择“上传引物合成订单”或“在线填写具体信息

2.1 在线填写,注意事项如下:

 

① Primer名称可以随意,但最好唯一,且便于识别。

② 序列要求填写纯AGCT序列,大小写均可以。兼并碱基请用代码:R(A,g),Y(C,T),M(A,C),K(g,T),S(g,C),w(A,T),H(A,T,C),B(g,T,C),V(g,A,C),D(g,A,T),N(A,T,g,C)。为配合我们自动登入时的准确性,序列中请不要使用空格或其它非序列信息符号。

 

③ 提供总量:一般2 OD的引物至少可以做400次50 μl标准PCR反应。若合成2 OD,可以分装1管或者2管。

④ 纯化方法可点击右侧问号按钮,按照各种纯化的说明来进行选择:

 

⑤若Oligo需要修饰(如探针),请在相应位置选择需要的修饰方式;若所用引物不需要修饰,则不必选择。

 

⑥对于中间修饰,可以按照以下方法进行添加,以中间dT添加BHQ-1修饰为例,首先鼠标选择需要修饰的T碱基,如图所示:

 

然后在“中间修饰”中选择Int BHQ1 dT,点击“添加”,添加之后会出现该修饰的相应标记,如图中红圈所示:

 

此时,序列中选择的“T”已经变成“/iBHQ1dT/”标记,如图所示,说明添加成功。添加之后,建议再对oligo序列进行核实。

 

2.2上传引物合成订单:若您需要提交的量比较大,可以选择“上传引物合成订单”。

① 点击“上传您的合成订单”→“下载模板”

 

② 填写OrderDetail-online Excel表格,规则同上 

③ 填写好之后保存,点击“选择文件”,上传您的Excel表格。

④ 上传完成后,无需再填写下方的表单。

3. 表单填写好之后,点击“添加”按钮,会弹出如下对话框,点击“确定”可以进入购物车查看。

 

4. 在“购物车”的DNA合成订单中,可以选择需要合成的Oligo,进行结算。这样我们就会收到您的在线订单,并尽快为您合成、发货。