网 站
反 馈
网 站
指 南

联系生工

有任何问题,请联系技术部门或销售办事处

联系技术 联系销售

微生物基因组改造

服务简介

生工生物采用经典的自杀质粒方法和高效率的噬s菌体Red 重组系统,经过多年的技术和资源积累,微生物基因组改造是通过打断、缺失或替换基因组上目的基因,达到研究和利用基因功能和性状的目的,已成功地在以下种类的微生物中实现了基因改造:大肠杆菌(实验室菌株和野生菌株)、沙门氏菌、奇异变形杆菌、阪崎肠杆菌、阴沟肠杆菌、葡萄球菌、链球菌、乳酸菌、假单胞菌等。

技术支持

Tel:021-57072092
Email:service6@sangon.com

基本流程

自杀质粒方法:

构建携带打靶片段和抗性筛选标记的重组自杀质粒
通过接合或电转化目标微生物中(因为质粒本身无法复制,仅有完整质粒整合到基因组上的克隆才能存活并形成克隆)
大量单克隆筛选
获得目标基因的正确改造菌株

Red 重组系统:

构建打靶序列(可以采用经PCR扩增获得的线性DNA)
与表达Lambda噬菌体三种Red重组酶(Bet,Exo和Gam)的质粒共转染目标菌
在阿拉伯糖的诱导下构建菌体内临时性的Red重组系统利(用该系统极其高效的同源重组效率,是大肠杆菌RecA重组系统的10倍)
大量单克隆筛选
获得目标基因的正确改造菌株

订购信息

服务项目 服务内容 周期
微生物基因改造 包括插入抗性基因打断目的基因、插入抗性基因缺失目的基因、目的基因插入或替换原有基因和改造菌株的无痕处理 1-3月

客户提供

提供样品
带有单菌落的平板、斜面或甘油菌保。
提供信息
客户需要提供详细的菌株基因型、抗性情况或ATCC NO.等情况;细菌生活所必需的基因一般无法进行改造,客户实验前需要确认目的基因是否会影响大肠杆菌的正常生长,若由于目的基因为细菌生长必需基因使实验失败所造成的一切损失由客户承担。

交付

交付成品

经过改造后的菌种的穿刺菌保、引物等。

交付成品

实验报告 (包括PCR 产物照片、测序结果等)、测序彩色波形图、测序方向图、碱基序列图、电子版结果。