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编 号 | 包装 | 库存 | 目录价(¥) | 您的价格(¥) | 数 量 |
B540194-0001 | 10 UG | 现货 |
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概述
pPIC9K载体中存在卡那抗性基因,允许利用卡那抗性在酵母体内筛选多克隆拷贝,载体其余部分与pPIC9载体完全一样。pPIC9K载体能够使用的毕赤酵母宿主菌是KM71和GS115。pPIC9K载体详细信息如下:pPIC9K载体大小9276 bp,是融合表达载体。载体构建过程中,可供使用的单一限制性内切酶位点为SnaB I, EcoR I, Avr II, Not I.利用alpha因子分泌信号肽,分泌表达蛋白基因。在载体构建过程中,你的基因必须保证与信号肽的起始密码子的读码框一致。毕赤酵母中利用HIS4进行筛选。为了将基因插入GS115或KM71的AOX区,使用SacI限制性内切酶线性化质粒(GS115中产生His+Mut+基因型,KM71中产生His+ MutS基因型) 为了将基因插入GS115或KM71的His4区, 使用Sal I或者Stu I限制性内切酶线性化质粒(GS115中产生His+ Mut+基因型,KM71中产生His+ MutS基因型)将基因插入GS115的AOX1区域,需要使用Bgl II线性化质粒(产生His+MutS基因型)。
属性
质粒类型 | 毕赤酵母表达载体 |
启动子 | AOX1 |
表达水平 | 高 |
克隆方法 | 多克隆位点,限制性内切酶 |
载体大小 | 9276bp |
5'测序引物及序列 | 5′ AOX1:5′-GACTGGTTCCAATTGACAAGC-3′ alpha-Factor-F: 5′-TACTATTGCCAGCATTGCTGC-3′ |
3'测序引物及序列 | 3′ AOX1:5′-GCAAATGGCATTCTGACATCC-3′ |
载体标签 | N-alpha factor |
载体抗性 | 氨苄青霉素(Ampicillin) |
筛选标记 | HIS4 |
备注 | 利用alpha分泌因子,分泌表达蛋白 |