Order NO. B540194
产品描述
概述
pPIC9K载体中存在卡那抗性基因,允许利用卡那抗性在酵母体内筛选多克隆拷贝,载体其余部分与pPIC9载体完全一样。pPIC9K载体能够使用的毕赤酵母宿主菌是KM71和GS115。pPIC9K载体详细信息如下:pPIC9K载体大小9276 bp,是融合表达载体。载体构建过程中,可供使用的单一限制性内切酶位点为SnaB I, EcoR I, Avr II, Not I.利用alpha因子分泌信号肽,分泌表达蛋白基因。在载体构建过程中,你的基因必须保证与信号肽的起始密码子的读码框一致。毕赤酵母中利用HIS4进行筛选。为了将基因插入GS115或KM71的AOX区,使用SacI限制性内切酶线性化质粒(GS115中产生His+Mut+基因型,KM71中产生His+ MutS基因型) 为了将基因插入GS115或KM71的His4区, 使用Sal I或者Stu I限制性内切酶线性化质粒(GS115中产生His+ Mut+基因型,KM71中产生His+ MutS基因型)将基因插入GS115的AOX1区域,需要使用Bgl II线性化质粒(产生His+MutS基因型)。
属性
质粒类型 |
毕赤酵母表达载体
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启动子 |
AOX1
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表达水平 |
高
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克隆方法 |
多克隆位点,限制性内切酶
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载体大小 |
9276bp
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5'测序引物及序列 |
5′ AOX1:5′-GACTGGTTCCAATTGACAAGC-3′
alpha-Factor-F: 5′-TACTATTGCCAGCATTGCTGC-3′
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3'测序引物及序列 |
3′ AOX1:5′-GCAAATGGCATTCTGACATCC-3′
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载体标签 |
N-alpha factor
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载体抗性 |
氨苄青霉素(Ampicillin)
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筛选标记 |
HIS4
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备注 |
利用alpha分泌因子,分泌表达蛋白
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