概述

5’-RACE试剂盒包含逆转录酶、重组末端转移酶和扩增酶。Reverse Transcriptase Mix（RNase H-）含有dNTP、RNase Inhibitor、Reverse Transcriptase、Reverse Transcriptase Buffer等，逆转录酶可逆转录全长15kb的cDNA片段，具有高灵敏度和快速扩增等特点，由于其热稳定性高（高达55°C），对于富含GC或具有复杂二级结构的RNA模板有明显优势。该逆转录酶可以实现高效的cDNA合成。本试剂盒应用了套式（巢式）PCR原理，用嵌套的特异性引物和PCR锚定引物，增加了PCR扩增的特异性与灵敏度，可以对少量样品或低丰度的基因进行5’RACE实验，并且对长片段的5’RACE扩增具有明显优势。Taq SuperMix含有dNTP、Mg2+、Taq酶、Buffer等，扩增得到的PCR产物的3’端附有一个“A”碱基，可直接克隆于T-Vector中测序，如条带单一可以直接用R2引物测序。试剂盒中提供的Control Total RNA，使用Control Primer可扩增出Human（GAPDH）基 因5’末端391 bp的DNA片段。

特点

• 1. 高灵敏度：采用了套式PCR法，对低丰度的基因或极少量的RNA样品同样可以进行5′RACE实验。
• 2. 高特异性：高保真的扩增酶，保证扩增的特异性。
• 3. 长片段：试剂盒中使用了本公司特殊改良的M-MLV（RNase H-）反转录酶，反转录性能优良，最长合成片段15kb。

应用

快速扩增全长，用于功能基因的研究、蛋白表达等。

使用说明

试剂盒中提供的Taq SuperMix、Reverse Transcriptase Mix（RNase H-）用完后及时放入-20°C冻存。

组分

5'adaptor Primer、5'RACE Outer Primer、5'RACE Control Outer Primer、5'RACE Control Inner Primer、dCTP、Control Total RNA、RNase H Mix、5×TdT Buffer、TdT酶、RNase-free water、Reverse Transcriptase Mix（RNase H-）、Taq SuperMix

适用样本

动物、植物、病毒等