概述

由于酵母对重组表达的蛋白质有真核细胞相似的翻译后修饰的功能，同时又有培养成本低廉等优点，酵母已成为研究蛋白相互作用和真核基因表达的重要工具。但酵母细胞壁坚硬，传统的强碱法提取蛋白，使得大多数蛋白发生变性；而玻璃珠法提取蛋白会使得玻璃珠对蛋白产生一定的非特异性吸附作用，导致蛋白质的损失。该一步法酵母活性蛋白提取试剂盒采用一种温和的非离子型去污试剂，可在20 min内从酵母细胞中提取可溶性蛋白，而且绝大对数蛋白可以保持活性。通过对毕赤酵母的可溶性蛋白提取表明，该方法提取效率要高于传统的玻璃珠法。本试剂盒可以使用20次。

特点

• 不需要剧烈地机械磨碎和长时间的破壁酶消化，比较适合于酵母胞内重组蛋白的快速筛选； 可以从20 × 50 mg湿重的新鲜或冻存酵母中提取所需要的可溶性蛋白质，而且绝大多数蛋白可以保持活性； 提取的蛋白质可以透析去除离子和去污试剂，或将缓冲液替换为所需要的合适缓冲液； 该试剂盒所用提取液也可以用于大肠杆菌等革兰氏阴性细菌中可溶性蛋白质的提取； 可以在20 min内完成整个实验过程。

应用

提取的蛋白质通过透析换液后可以适用于GST，His标签蛋白的亲和纯化。也可用于蛋白活性测定。

组分

提取试剂，蛋白酶抑制剂， DTT ，PMSF