Order NO. A339160
产品描述
概述
载体宿主:大肠杆菌,载体用途:蛋白表达,基因种属:人,基因类型:ORF,原核抗性:Kan,荧光蛋白:未知。
本产品/服务仅供科研使用
应用
1.溶解:
收到质粒干粉后,请加入 20μl 无菌水至管底,溶解质粒,室温静置 1min;
2.混合(吸附质粒):
200μl 感受态细胞 + 质粒 DNA 5~10µl 混匀,冰上放置 30min;
3.热激导入:
42℃静置 90s;
4.收缩膜孔:
冰浴 2min;
5.修复培养:
毎管加 800µl LB 液体培养基,37 ℃培养 1h 150 r/min;
6.筛选培养:
将适当体积(100 µl)的复苏细胞,涂布在相应抗性的 LB 平板上,正置平皿 30min(琼脂面务必干燥后),
倒置培养 12-16h,出现菌落。
7.提取:
挑取单克隆菌落至相应抗性 LB 液体培养基中,震荡培养 12-16h,根据试验需要提取质粒。
属性
培养基 |
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25°C)
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培养条件 |
LB +卡那霉素,37°C(克隆菌株DH5α,351bp)
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安全等级 |
0
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存储形式 |
质粒干粉
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