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Order NO. B500517
M-MuLV Reverse Transcriptase, RNase H-, Point Mutant
英文名 M-MuLV Reverse Transcriptase, RNase H-, Point Mutant
相关类别 反转录PCR(RT-PCR) 储存 冷冻(-20℃)
Uniprot ID M-MuLV Reverse Transcriptase, RNase H-, Point Mutant    
   
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产品描述

概述

该产品是一种遗传修饰的M-MuLV RT,其与M-MuLV RT结构和催化特性不同。该酶具有RNA和DNA依赖的 polymerase活性,但是却没有RNase H活性(该活性区域点突变),RNase H可以特异性的水解DNA-RNA杂合链中的RNA,去除RNase H的活性可以有利于提升cDNA合成的长度。该酶不能降解第一链cDNA合成时形成RNA-DNA 复合物中的RNA,因此可获得全长的cDNA。M-MuLV Reverse Transcriptase, (RNase H-, Point Mutant) 在宽的温度范围(37~42°C)内有酶活性,因此适合逆转录具有较多二级结构的RNA分子。

特点

  • 高产量制备全长的第一链cDNA,最长可达15 kb 37~42°C范围具有最佳活性 温度高达50°C时仍有活性 合成掺入修饰核苷酸,如Cy3-、Cy5-、罗丹明、氨基、荧光标记的核苷酸

应用

第一链cDNA合成,用于RT-PCR和实时RT-PCR 可提高反应温度,降低二级结构对逆转录的影响 合成cDNA用于克隆和表达研究 制备芯片用于标记的cDNA探针,可用于杂交试验,如microarray杂交 DNA标记 引物延伸法分析RNA

组分

每个包装包含:M-MuLV Reverse Transcriptase, (RNase H-, Point Mutant)(200U/ul),5X M-MuLV RT Buffer

属性

来源 莫洛尼鼠白血病病毒
单位定义 一个活性单位是指在37°C、10分钟内催化将1 nmol 脱氧核苷酸转移到酸沉淀物质中所需的酶量
5X M-MuLV RT Buffer 250 mM Tris-HCl (pH8.3, 25°C),375 mM KCl, 15 mM MgCl2, 50 mM DTT
储存缓冲液 20 mM Tris-HCl (PH7.5), 0.2 M NaCl, 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, 0.01% (v/v) Np-40, 50% (v/v) 甘油
失活 85°C加热5分钟
抑制剂 金属螯合剂、无机磷酸盐、焦磷酸和多胺,尿素和巯基类试剂
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