英文名 | GV3101 Agrobacterium Competent Cells | ||
相关类别 | 载体与菌株 | 储存 | 超低温(-80℃) |
编 号 | 包装 | 库存 | 目录价(¥) | 您的价格(¥) | 数 量 |
B528430-0010 | 10 X 100 ul | 现货 |
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B528430-0100 | 100 X 100 ul | 现货 |
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概述
GV3101 菌株为 C58 型背景,核基因中含有筛选标签——利福平抗性基因 Rif,为了便于转化操作,此菌株携带一无自身转运功能的胭脂碱型 Ti 质粒 pMP90 (pTiC58DT-DNA),此质粒含有 vir 基因 (vir 基因是 T-DNA 插入植物基因组必需的元件,pMP90 (pTiC58DT-DNA)质粒自身的 T-DNA 转移功能被破坏,但可以帮助转入的双元载体 T-DNA 顺利转移)。pMP90 (pTiC58DT-DNA)型 Ti 质粒含有筛选标签:Gent,赋予 GV3101 菌株庆大霉素抗性,适用于拟南芥、烟草、玉米、土豆等植物的转基因操作,本公司生产的 GV3101 化学转化感受态细胞经特殊工艺制作,pCAMBIA2301 质粒检测转化效率 ≥ 10^4 cfu/μg DNA。
使用说明
1. 从-80°C冰箱内取出GV3101农杆菌感受态细胞,迅速插入冰盒内,使其溶解。 2. 加入DNA样品轻轻混匀,依次于冰盒上静置5分钟、液氮5分钟(或干冰乙醇浴盒-80°C和-80°C冰冻)、37°C水浴5分钟、冰浴5分钟。 3. 添加900 μl不含抗生素的YEB液体培养基,混合均匀,于28°C震荡培养2-3小时。 4. 6000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块涂布于含相应抗生素的YEB 平板上,倒置放于28°C培养箱培养2-3天。(当平板只含有 50 μg/ml Kan 时,28 °C培养 48小时即可;平板中同时加入 50 μg/ml Kan,20 μg/ml Rif 时,需 28°C培养 60 小时;如果使用的平板含有 50 μg/ml Rif 则需要28°C培养72-90小时。)
组分
GV3101 Agrobacterium Competent Cells :10 x 100 μl/20 x 100 μl/100 x 100 μl pCAMBIA2301 plasmid (10 ng/μl) :10 μl (100支包装规格不含有)
属性
包装规格 | 10 x 100 μl/ 20 x 100 μl/100 x 100 μl |
基因型 | C58 (RifR) Ti pMP90 (pTiC58DT-DNA) ( GentR) Nopaline |
保存条件 | 长期储存于-80°C,可保存半年,避免反复冻融。 |