概述

该限制性内切酶识别5'- CCC↑GGG-3'的酶切位点，并在缓冲液Y中具有最佳活性，携带来自粘质沙雷氏菌的smaIR克隆基因的重组大肠杆菌,一般用于酶切。

特点

• 所有酶都适用于通用的Single Buffer缓冲液，可在统一反应体系内任意组合，无需多次单酶切或更换酶切缓冲液，方便、稳定、快速、可精准切割载体。

应用

分子克隆等

使用说明

高酶浓度和非最佳缓冲液的使用可能导致星活性， 使用BSA时不要长时间孵育。 为了获得更高的活性，应将BSA加入到1X 反应混合物中至最终浓度为100 μg/ ml。

组分

500 U/管SmaI，10X buffer Y，10X Single buffer

属性

识别位点	5'- CCC↑GGG-3'
来源	携带来自粘质沙雷氏菌的smaIR克隆基因的重组大肠杆菌
最适缓冲液	10X buffer Y(330 mM Tris-乙酸盐（pH 7.9），100 mM 乙酸镁，660 mM 乙酸钾，1 mg/mL BSA)
通用缓冲液	10X Single buffer
孵育	30°C
酶活定义	1 U酶是在1 h，30°C，总反应体积为50 μl 时水解1 μg λDNA所需的酶
储存	-20°C
储存条件	10 mM Tris-HCl (pH 7.4，25°C), 100 mM KCl, 1 mM EDTA, 1 mM DTT, 0.2 mg/mL BSA, 50%甘油
连接与重切	使用 10 倍酶量消化底物，回收酶切产物。在 22°C 下使用适量 T4 DNA 连接酶可以将超过 80%的酶切产物重新连接。将连接产物再次回收后，使用相同的内切酶可以重新切开超过 95%的连接产物
甲基化影响	dam甲基化不敏感， dcm甲基化不敏感，CpG甲基化敏感
热失活	在65°C加热20分钟失去活性