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Order NO. B600511
T4 DNA 连接酶
英文名 T4 DNA Ligase
相关类别 DNA修饰酶 储存 冷冻(-20℃)
Uniprot ID T4 DNA 连接酶    
   
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产品描述

概述

该产品催化粘端或平端双链DNA或RNA中毗邻的5’ 磷酸基团和3’ 羟基末端之间形成磷酸二酯键。酶还可以修复双链DNA,RNA或DNA/RNA复合体中的单链切口,连接DNA的粘性和平末端,但是该酶对单链核酸无酶活性。T4 DNA连接酶需要辅因子ATP

应用

粘性末端或平末端双链DNA的连接;双链寡核苷酸接头与双链DNA连接;双链DNA、RNA或DNA-RNA复合体中缺口的修复;连接酶介导的RNA检测;位点特异性突变;扩增片段长度多态性

使用说明

连接产物酶切前无需纯化,可将限制酶直接加入连接反应混合物中

组分

T4 DNA Ligase,10X T4 DNA Ligase Buffer,50% PEG 4000

属性

描述 T4 DNA连接酶催化双链DNA或RNA中毗邻的5’ 磷酸基团和3’ 羟基末端之间形成磷酸二酯键。酶还可以修复双链DNA,RNA或DNA/RNA复合体中的单链切口,连接DNA的粘性和平末端,但是该酶对单链核酸无酶活性。T4 DNA连接酶需要辅因子ATP。
来源 含有T4噬菌体克隆基因30的大肠杆菌
内含物 T4DNA连接酶,10X T4 DNA连接酶 Buffer
分子量 55.3 kDa,单体
单位定义 在ATP-PPi交换反应中,37°C、20分钟内将1 nmol[32PPi]转化为Norit可吸收形式所需要的酶量定义为1 U。
10X T4 DNA Ligase 缓冲液 400 mM Tris-HCl, 100 mM MgCl2, 100 mM DTT, 5 mM ATP(pH7.8, 25°C)
保存缓冲液 20 mM Tris-HCl(pH7.5), 50 mM KCl, 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, 50% (v/v) 甘油
用途 粘性末端或平末端双链DNA的连接;双链寡核苷酸接头与双链DNA连接;双链DNA、RNA或DNA-RNA复合体中缺口的修复;连接酶介导的RNA检测;位点特异性突变;扩增片段长度多态性。
抑制 当反应体系中NaCl或KCl的浓度超过200 mM时,可强烈抑制T4 DNA 连接酶活性。
失活 65°C加热10分钟或者70°C加热5分钟。
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