概述

本试剂盒是以活化的生物素与抗体或蛋白上的伯胺交联，形成稳定的酰胺键，实现生物素与抗体或蛋白质的偶联反应。

特点

• 1. 可偶联0.2-10 mg的抗体，两种包装规格200 μg和1 mg的最佳偶联量分别为200 μg和1mg。其他蛋白质需根据抗体的分子量（约160 kDa）估算偶联量，抗体分子量是蛋白质分子量的多少倍，则能偶联多少倍的蛋白量，如蛋白质的分子量是80 kDa，抗体分子量是其2倍，则能偶联2mg的该蛋白。
• 2. 经脱盐柱离心可得到高纯度的偶联产物。

使用说明

1. 偶联：按不同的包装规格将需要偶联的抗体或蛋白、活化生物素溶液、生物素偶联液加入1.5 ml离心管中。在旋转混悬仪上，室温缓慢反应2小时。
2. 纯化
2.1 标记脱盐柱的一端并确保在离心期间标记一直朝外。
2.2 将脱盐柱离心：1000 g离心1分钟，以压实树脂。
2.3 去除脱盐柱顶部和底部的盖子，放入合适的离心管中（1 ml放入2 ml离心管，5 ml放入15 ml离心管）。离心：1000 g，2分钟，除去储存缓冲液。
2.4 1 ml脱盐柱加入300 μl生物素偶联液到柱中（1 ml脱盐柱的加样体积范围为30-300 μl），1000 g离心2分钟以除去储存缓冲液。5 ml脱盐柱加入1.5 ml生物素偶联液到柱中（5 ml脱盐柱的加样体积范围为0.75-1.5 ml），1000 g离心2分钟以除去储存缓冲液。
2.5 重复上一步骤五次，每次离心后弃掉下层液体。
2.6 将脱盐柱放入新的离心管中，缓慢的将第1步的偶联产物转入树脂的中心。1 ml脱盐柱离心：1000 g，4分钟。5 ml脱盐柱离心：1000 g，8分钟。
2.7 收集离心管中液体即为偶联产物。

组分

活化生物素，活化生物素稀释液，生物素偶联液，脱盐柱