概述

本试剂盒提供快速而简单的偶联过程，FITC是目前最为常用的荧光染料之一，通过抗体或蛋白的伯胺（即赖氨酸残基）与FITC的硫碳胺基结合，形成FITC-蛋白质结合物，即FITC标记抗体或蛋白。标记抗体或蛋白可应用于ELISA，Western blot，IF和 FACS分析等。

特点

• 1. 标记过程简单迅速。</li><li>2. 提供了FITC标记所需全部试剂。 </li><li>3. 每次可标记0.2-1 mg的抗体。 </li><li>4. 经脱盐柱离心可得到高纯度的偶联产物。

使用说明

1. 偶联：按不同的包装规格将需要偶联的抗体和FITC溶液加入1.5 ml离心管中。在旋转混悬仪上，37°C避光反应90分钟。<br/>2. 纯化<br/>2.1 标记脱盐柱的一端并确保在离心期间标记一直朝外。<br/>2.2 将脱盐柱离心：1000 g离心1分钟，以压实树脂。<br/>2.3 去除脱盐柱顶部和底部的盖子，放入合适的离心管中（1 ml放入2 ml离心管，3 ml放入15 ml离心管）。离心：1000 g，2分钟，除去储存缓冲液。<br/>2.4 1 ml脱盐柱加入500 μl纯化缓冲液到柱中（1 ml脱盐柱的加样体积范围为30-300 μl），1000 g离心2分钟弃掉下层液体。3 ml脱盐柱加入1500 μl生物素偶联液到柱中（3 ml脱盐柱的加样体积范围为300-900 μl），1000 g离心2分钟弃掉下层液体。<br/>2.5 重复上一步骤五次，每次离心后弃掉下层液体。<br/>2.6 将脱盐柱放入新的离心管中，缓慢的将第1步的偶联产物转入树脂的中心。1 ml脱盐柱离心：1000 g，4分钟。3 ml脱盐柱离心：1000 g，6分钟。<br/>2.7 收集离心管中液体即为偶联产物。<br/>3. 保存：标记好的抗体或蛋白溶液在4°C避光可短期保存，若要长期保存，可以进行冻干，或加入40%甘油后分装在-20°C避光保存，避免反复冻融。

组分

FITC，FITC稀释液，FITC偶联缓冲液，纯化缓冲液，脱盐柱