Southern Blot印迹杂交
服务简介
Southern 印迹杂交(Southern blot)是进行DNA 特定序列定位的通用方法。1975 年由英国人Southern 创建,是研究DNA 图谱的基本技术。其基本原理是:具有一定同源性的两条核酸单链在一定的条件下,可按碱基互补的原则形成双链,此杂交过程是高度特异的。结合凝胶电泳和核酸内切限制酶分析的结果,便可绘制出DNA 分子的限制图谱。Southern 印迹杂交一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA 片段,将胶上的DNA 变性并在原位将单链DNA 片段转移至尼龙膜或其他固相支持物上,经干烤或者紫外线照射固定,再与相对应结构的标记探针进行杂交,用放射自显影或酶反应显色,从而检测特定DNA分子的含量。
主要流程
订购信息
服务项目 | 服务内容 | 周期 |
基因组DNA提取 | 获得高纯50 μg基因组DNA | 1周 |
DNA探针设计合成 | 引物设计、合成及验证 | 1-2周 |
DIG探针标记 | 标记一条探针 | 2个工作日 |
Southern Blot检测 | 杂交一张膜,每张膜(1-8个样品) | 3-4周 |
重复杂交 | 标记一条探针,杂交已有的膜。 | 1-2周 |
客户提供
提供信息
待杂交目标基因序列和引物序列(公司可以提供引物设计扩增,费用另计)。
请注明酶切方案,如果项目中需要用到非常规的限制性内切酶,需额外加收酶切费用或有客户提供相应的限制性内切酶。
提供样品
客户提供的样品必须干冰或带冰袋运送。
如提供DNA 样品必须要达到以下条件:
DNA 完整性好,无降解或RNA 污染,客户需提供电泳图;
DNA 纯度高,客户需提供分光光度检测OD260/OD280 在1.8 左右;
勿用TE 溶解DNA,DNA 浓度不低于0.8 μg/μl,杂交需模板DNA 约20 μg/泳道/次;
长途运输至乙方,可将检测合格的DNA溶液编号密封,注意切勿泄漏,低温快递。
交付
交付成品
剩余模板和引物
交付报告
实验报告(详细操作步骤,胶片,胶片分析等)