同位素标记相对和绝对定量（iTRAQ）技术
服务简介
iTRAQ是目前运用广泛的一种标记定量蛋白质组技术，通过与氨基酸末端氨基以及赖氨酸残基的游离氨基结合，实现对多肽的标记，并通过不同分子量的试剂对不同来源样品进行标记的方式实现不同样品间蛋白质组比较的目的。iTRAQ试剂结构由指示基团、中性平衡基团和反应基团三部分组成。不同指示基团及其相对应平衡基团的质量和都相同，而反应基团能与赖氨酸ε氨基和所有肽链的氨基末端连接，可标记所有氨基酸。不同标记试剂与来源于不同样品胰酶消化后的肽段结合，经过色谱分离，并通过一级质谱和二级质谱。平衡基团在二级质谱时发生中性丢失，而报告基团在二级质谱低质量区域产生多个报告离子，其信号强度分别代表该标记样品的表达量，根据报告离子的峰面积计算同一蛋白质同一肽段在不同样品间的比值，从而实现蛋白的相对和绝对定量。
主要流程
蛋白提取
定量
蛋白标记
色谱分离和质谱上机
数据库检索及差异表达蛋白筛选
差异表达蛋白进行经典生物信息学分析
技术优点
- 通量高
- 重复性好且定量准确
- 分辨率高
- 数据丰富
- 自动化程度高
订购信息
| 项目名称 | 内容 | 服务周期 |
| iTRAQ（TMT） | 蛋白相对绝对定量与生物信息学统计（标记物不同） | 6~8周 |
交付
交付报告
蛋白浓度测定结果；SDS-PAGE预实验结果；样品编号对照表；色谱图；蛋白原始检索结果文件；蛋白原始质谱数据文件；iTRAQ results；生物信息学分析材料。
部分结果展示
图1 火山图 图2 GO 富集分析概图
图3 蛋白相互作用网络图 图4 表达模式聚类热图