基因焦磷酸测序检测
服务简介
焦磷酸测序（Pyrosequencing）技术是由4 种酶（DNA 聚合酶(DNA polymerase)、ATP 硫酸化酶(ATP sulfurytase) 、荧光素酶(luciferase)和三磷酸腺苷双磷酸酶(Apyrase)）催化的同一反应体系中的酶级联化学发光反应。每一轮测序反应体系中只加入一种脱氧核苷酸三磷酸(dNTP)。如果该dNTP 与模板配对，则会在DNA 聚合酶的作用下，添加到测序引物的3'末端，同时释放出一个分子的焦磷酸(PPi)。掺入的dNTP和释放的PPi 是等量的。CpG 甲基化焦磷酸测序检测法基于引物延伸的Pyrosequencing 技术，通过将链合成过程中释放出的焦磷酸(PPi)转化成光信号来监测链的合成过程。该测序平台可应用于各种遗传多态性标记的分析检测，如SNP、突变、插入/缺失、甲基化、基因拷贝数等；等位频率分析；此外，还可应用于各种微生物的鉴定、分型、耐药性评估，并可对多种亚型或野生株及突变株、耐药株组成的复杂群体中的各个组分含量直接加以定量评估。
主要流程
DNA/RNA的提取（甲基化检测DNA需要亚硫酸氢盐处理）
生物素标记引物设计
PCR
焦磷酸测序预实验
焦磷酸测序仪检测正式实验
数据处理
提交报告
订购信息
| 服务项目 | 服务内容 | 周期 |
| 基因焦磷酸测序检测 | 服务项目包括：直接上机测序、CpG甲基化位点定量检测、转录组mRNA水平突变点定量检测、基因组DNA水平SNP位点检测和微生物分型及耐药基因检测 | 1~6周 |
客户提供
提供样品
血液样品：样品为EDTA 抗凝或枸椽酸钠抗凝，样品量大于0.5 ml，样品采集后于-20°C 或-80°C保存，低温（≤ -4°C）运输。
组织样品：样品可以为新鲜组织（最好-80°C 保存）或石蜡包埋的组织，也可以是95%乙醇中固定的组织，组织量大于100 mg。
DNA 样品： 纯度OD260/280 比值为1.8-1.9，浓度≥ 50 ng/μl，体积≥ 50 μl。
提供信息
基因信息：提供甲基化待测序列和微生物分型及耐药基因（≤ 60 bp）及上下游保留300 bp、SNP位点的RS 号。
交付
交付报告
实验报告（包括实验过程、方法、耗材试剂等）、焦磷酸测序PDF 文件。